Sunum yükleniyor. Lütfen bekleyiniz

Sunum yükleniyor. Lütfen bekleyiniz

Tekrarlayan implantasyon başarısızlığında sperm faktörünün yeri Dr. Engin Enginsu, Ph.D Dr. Engin Enginsu, Ph.D. III. ÜREME TIBBI DERNEĞİ KONGRESİ 2011.

Benzer bir sunumlar


... konulu sunumlar: "Tekrarlayan implantasyon başarısızlığında sperm faktörünün yeri Dr. Engin Enginsu, Ph.D Dr. Engin Enginsu, Ph.D. III. ÜREME TIBBI DERNEĞİ KONGRESİ 2011."— Sunum transkripti:

1 Tekrarlayan implantasyon başarısızlığında sperm faktörünün yeri Dr. Engin Enginsu, Ph.D Dr. Engin Enginsu, Ph.D. III. ÜREME TIBBI DERNEĞİ KONGRESİ 2011

2 IVF uygulamalarının ilk yıllarında sperm ayrıştırma yapılmıyordu Sperm seçimi Motil sperm Normal morfolojik sperm Testiküler dokudan sperm ekstraksiyonu Kromatin yapısı normal sperm… Fertilizasyon’dan sağlıklı çocuk doğumuna kadar etkili Tüm ART uygulamalarında fizyolojik inseminasyon hedeflenmeli Sperm Seçimi Neden Gerekli

3 En az iki spermiogram ◦ Ejakülat hacmi1.5’ten 5.0 mL’ye ◦ Sperm sayısı> 15 milyon / mL WHO 2010 ◦ Hareket>%30 ◦ Progresif hareket>%30 ◦ Morfoloji>%4 normal (MEUSC) Ve: ◦ Aglütinasyon yok ◦ Piyospermi yok ◦ Viskosite normal Semen Analizi

4 Sperm Anomali Oranı n=1776 SPERMED Laboratuvarı 2006

5 Morfoloji Baş ◦ Düzgün kontür oval ◦ Akrozom %40-%70 ◦ Ekvatorial segment konturlara uygun Boyun Kuyruk Değerlendirme 10x100 büyütmede

6 Morfoloji Semen analizi ile OPU günü arasındaki zaman morfolojiyi etkilemiyor (Sukcharoen N. Hum Rep’96) Strict Kriterler ile değerlendirildiğinde ◦ Fertil popülasyon cut-off %12 (Günalp S. Hum Rep’2001)

7 İzole Teratozoospermi Total globozoospermi Makrosefal sperm Total pinhead ◦ IUI-D Uzun baş ◦ Varikosel İzole teratozoospermi IUI a engel değil

8 Makrosefal Sperm ve PGD (Kahraman et al.RBM Online, 2004)

9 Makrosefal Sperm (Kahraman et al.RBM Online, 2004)

10 Globozoospermi

11 Globozoospermi Globozoospermi kromatinlerin sferik yapılanması ve akrozomal yapının tümüyle olmaması ile karakterize bir sendromdur. DNA yapısı bilinmiyor Sperm anöploidi oranında artış (vaka sunumu) (Carrell et al ) Anormal kromatin yapısı DNA zincir kırıkları (Calogero et al. 2002) Morfolojik değerlendirme ile tanı konur

12 Sperm Sentriol Bozuklukları Sperm sentriolü fertilizasyon ile oosite girer, duplike olur ve sperm asterini oluşturur Sentriol bozuklukları ◦ Embryonik gelişme bozuklukları ◦ İmplantasyon başarısızlıkları ◦ Abortus(Van Blerkom, 1996) (Rawe et al., 2002)

13 Berkovitz et al. 2003, Hum Rep Yüksek magnifikasyonda sperm seçimi IMSI Gebelik52.6 versus 18.4% İmplantasyon25.0±25.9 versus 5.9±12.9%

14 Hazout a. 2006, RBM Online Tekrarlayan IVF Başarısızlıklarında IMSI

15 Sperm DNA Hasarı Spermatogenez sırasında oluşan kromatin kondanzasyon bozuklukları Spermatogenez ya da üreme sistemindeki yollarda meydanagelebilecek apopitozis ROS nedeniyle oluşabilecek oksidatif stres

16 Sperm DNA Hasarı Fetal mutasyonlar ve doğacak bebekte kanser riski Kötü embryo gelişimi İmplantasyonu azaltır Düşük gebelik oranları Tekrarlayan gebelik kayıpları ◦ Reviewed in Chohan, et al., J Androl 27: 53-59, 2006

17 Sperm DNA Hasarı Tanısal Testler COMET Assay Halosperm TUNEL Chromomycin A3 Test DNA Breakage Detection-FISH Sperm Chromatin Structure Assay (SCSA)

18 Comet Assay ANORMAL NORMAL Agaroz üzerine yayılan spermlerde hücre elektroforezi DNA migrasyonu değerlendirilir

19 Halosperm ◦ DNA kırıklarının saptanması- FISH ◦ Asit ile denatürasyon ve nüklear proteinlerin çıkmasından sonra halo değerlendirilmesi

20 TUNEL Test DNA kırıklarındaki tek ve çift sarmal kırıkların saptanması TdT-mediated dUTP nick end labeling (TUNEL) ◦ DNA kırıklarını araştırmaları için kullanılan en yaygın yöntem

21 NORMAL KROMATİN APOPTOTİK KROMATİN TUNEL: Terminal deoxynucleotidyl transferase mediated dUTP-biotin Nick End Labelling

22 Sperm Chromatin Structure Assay (SCSA) ◦ Acridine Orange Test ◦ Floresan mikroskop ◦ Flow cytometry  Yeşil normal, kırmızı DNA kırıkları ◦ DNA Kırıkları = Kırmızı/Kırmızı + Yeşil İleri teknoloji malzeme gerekmekte

23 DFI, HDS Lin et.al. Fert. Ster. 2008

24 Kennedy et. al. RBM Online 2011 DFI, HDS

25 Hyalüronik Asit (HA): Fizyolojik Sperm Seçimi PH-20 proteini Hyalüronidaz dan farklı bir bağlanma bölgesine sahiptir (Gmaachl & Kreil, 93, Gacesa et al., 94) Sperm – Oosit Bağlanmasının Değerlendirilmesi Matür Sperm Normal Morfolojik Sperm (Kruger) Kromatin Yapısı Normal Sperm HBA ile IUI veya ICSI seçimi Gmaachl & Kreil, 93, Gacesa et al., 94

26 Olgun Sperm Anöploidi düşük Yüksek Fertilizasyon OranıO Hyaluron Binding Assay - HBA

27

28 HBA Sonuçlarının Değerlendirilmesi  >65% bound = good quality sperm ◦ Traditional IUI or IVF  <65% bound = “low binders” ◦ 20% of infertile couples ◦ ICSI using PICSI or SpermSlow

29 Hyalüronik Asit (HA): Fizyolojik Sperm Seçimi Parmegianni L et al JARG

30 Sperm Seçimi: Teknikler Yıkama Swim – up Swim – out Testiküler spermin hazırlanması Gradient IMSI HA bağlı sperm

31 Sonuçlar İnseminasyon türü ne olursa olsun sperm seçimi ART başarısını etkileyen en önemli faktördür Sperm morfolojisi ve DNA bütünlüğü sağlıklı canlı doğumlarda önemli etkendir Sperm yıkama teknikleri standardize edilmelidir IMSI ve HA kullanımı ile fizyolojik ICSI hedeflenmelidir


"Tekrarlayan implantasyon başarısızlığında sperm faktörünün yeri Dr. Engin Enginsu, Ph.D Dr. Engin Enginsu, Ph.D. III. ÜREME TIBBI DERNEĞİ KONGRESİ 2011." indir ppt

Benzer bir sunumlar


Google Reklamları