Bakteri Tanımlama Prosedürü 1. Kısım : Küçültülmüş API Sisteminin Hazırlanması
Malzemeler Fizyolojik steril su tüpü (5 mL) Saf su Yağ Agar Petri kabı Kapaklı bir kutuda API sistemi Steril olmayan pipet Steril pipetler
1. Bakteri Süspansiyonunun Hazırlanması
UYARI! Örneğin Bunzen beki etrafında aseptik kalması sağlanmalıdır 1.1. Steril bir özeyle agar Petri kabından bir bakteri kolonisi alın. UYARI! Örneğin Bunzen beki etrafında aseptik kalması sağlanmalıdır
UYARI! Örneğin Bunsen beki etrafında aseptik kalması sağlanmalıdır. 1.2. Bu bakteri kolonisiyle steril fizyolojik su tüpünün (5 mL) içinde bir süspansiyon oluşturun. Suyun içerisinde, özeyi tüpün kenarına sürterek bütün bakterilerin dağılmasını sağlayın. UYARI! Örneğin Bunsen beki etrafında aseptik kalması sağlanmalıdır.
S 1.3. Tüpü elinizle dairesel bir şekilde sallayarak karışımınızı homojen hale getirin ve tüpün üzerine «S» yazın.
2. API Sisteminin Hazırlanması :
2.1. Kutuyu bütün boşlukları kapatacak şekilde saf su ile doldurun. 2.2. Suyu bütün boşluklara yaymak için kutuyu dairesel şekilde hafifçe çevirin. Daha sonra steril olmayan bir pipetle fazla suyu çekin.
2.3. Kıskacı kullanarak API sistemini kutunun üzerine koyun. 2.4. Kapağı kapatın ve üzerindeki plastik etikete «masa numaranız»ı yazın.
2. API Sisteminin Doldurulması
Tanıtım Kap Mikrotüp Örnekler : Altı çizilmemiş test Kutucuk içine alınmış test Altı çizilmiş test
3.1. Kutuyu açın ve kapağını kutuyu eğimli bir pozisyonda tutabilmek için destek olarak kullanın.
UYARI! Örneğin Bunzen beki etrafında aseptik kalması sağlanmalıdır. 3.2 Süspansiyonunuzu homojen haline getirmek için dairesel şekilde çevirin. Steril bir pipetle « S » süspansiyonun 2 mililitresini alın. S UYARI! Örneğin Bunzen beki etrafında aseptik kalması sağlanmalıdır.
3.3 Testleri bu süspansiyonu kullanarak ve aşağıdaki kurallara uygun bir şekilde tamamlayınız: Altı çizilmiş ya d çizilmemiş bir test için (örneğin: ONPG ya da ADH) sadece mikrotüpü doldurun. Kutucuk içine alınmış bir test için (örneğin: CIT ), mikrotüpü ve kabı doldurun. Kap mikrotüp
3.4 Steril bir pipet kullanarak, altı çizilmiş testlerdeki 5 kaba yağ ekleyin (ADH, LDC, ODC, H2S, URE). Kap
3.5 Kutuyu kapatın ve 16 saat boyunca 37°C de inkübasyona bırakın. İnkübasyon makinesindeki API kutusu
Kuluçkadan sonraki ikinci gün, bakterinizi tanımlayın. (2. kısım). 4. Sonuçlarını Analiz Et Kuluçkadan sonraki ikinci gün, bakterinizi tanımlayın. (2. kısım).