Allium sativum Organosülfür Bileşiklerinin H2S Oluşturma Özelliklerinin ve MCF-7 ve HuT78 Kanser Hücre Dizileri Üzerine Anti-Proliferatif Etkilerinin Araştırılması Züleyha Nihan Yurtsever1, Emine Karakus1 ve Sonia Melino2 1 -Yıldız Teknik Üniversitesi, Fen-Edebiyat Fakültesi, Kimya Bölümü 2- Roma “Tor Vergata” Üniversitesi, Dogal Bilimler Fakültesi, Kimya Bölümü zuleyhanihanyurtsever@gmail.com ÖZET Sarımsaktan elde edilen organosülfür bileşikleri hem tek başlarına hem de diğer antitümör ilaçlarla birlikte kullanılarak kanser tedavisinde potansiyel ideal ajan olarak görev almaktadırlar. Organosülfür bileşikleri kanser önleyici etkiler göstermekte ve in vitro ortamda apoptozisin başlamasını sağlayarak tümör hücrelerinin proliferasyonunu engellemektedirler. Bu çalışmada öncelikle sarımsaktan suda çözünen organosülfür bileşik konjugatları yeni bir ekstraksiyon protokolüyle sentezlenmiş, elde edilen bu konjugatların ters faz-sıvı kromatografisi (RP-HPLC) ve sıvı kromatografisi-kütle spektrometrisiyle (LC-MS) karakterizasyonları yapılmıştır. Elde edilen bu ekstrakt ve konjugatların gasotransmitter H2S üretebilme yetenekleri metilen mavisi deneyi ile test edilmiş ve bu ekstraktların tryphan mavisi boya çıkarımı ve akış sitometrisi yöntemleriyle çeşitli kanser hücre dizilerinin proliferasyonunu önleme yetenekleri belirlenmiştir. Ekstraktların kanser hücresi oluşumuna etkilerini belirlemek için MCF-7 meme kanser hücreleri ve HuT78 lenfoblastom kanser hücreleri kullanılmıştır. Ek olarak, önemli bir yağda çözünen sarımsak organosülfür bileşiği olan ve çalışmamızda ticari olarak temin edilen diallil disülfür’ün (DADS) hücre içi stabilitesi ve çözünürlüğünü arttırmak amacıyla bu bileşiğin sığır serum albümini (BSA) ile mikroküreleri oluşturulmuş ve bu mikrokürelerin MCF-7 hücre proliferasyonu üzerine etkileri tryphan mavisi boya çıkarımı ve floresan mikroskopisi yöntemleri ile gözlemlenmiştir. MATERYAL VE YÖNTEM Sarımsak organosülfür bileşiklerinin glutatyonlu (GSH) ve glutatyonsuz, soğuk ve sıcak ortamda ekstraksiyonları gerçekleştirildi. Ekstraktların HPLC ve LC-MS ile karakterizasyonu yapıldı. Suda çözünen GSH’lı ve GSH’sız sarımsak organosülfür bileşik ekstraktlarının H2S oluşturma yetenekleri kolorimetrik metilen mavisi deneyi ile test edildi. Sarımsaktan elde edilen ekstraktlar HuT78 ve MCF-7 kanser hücre dizilerine, DADS-BSA mikroküreleri sadece MCF-7 hücre dizisi üzerine uygulandı. Tryphan mavisi boya çıkarımı, floresan mikroskopisi ve akış sitometrisi yöntemleriyle hücrelerin proliferasyonu üzerine olan etkiler gözlemlendi. Ticari olarak temin ettiğimiz DADS’ın, sığır serum albümini (BSA) ile mikroküreleri sonikasyon yöntemiyle oluşturuldu ve floresan mikroskobu altında oluşan mikroküreler gözlendi. SONUÇLAR VE TARTIŞMA DADS-BSA mikroküreleri ile muamele edilmiş MCF-7 hücrelerinin 24 saat sonunda floresan mikroskobu görüntüleri ve tryphan mavi boya çıkarımı deney sonuçları GSH’lı ve GSH’sız sarımsak ekstraktlarının HPLC kromatogramları ve LC-MS spektrumları GSH’lı ve GSH’sız sarımsak ekstraktlarının H2S oluşum (metilen mavisi) deney sonucu GSH’lı ve GSH’sız sarımsak ekstraktlarıyla muamele edilmiş HuT78 hücrelerinin akış sitometrisi ve tryphan mavi boya çıkarımı deneyi sonuçları Ga pikinin LC-MS spektrumunda 614.2 m/z -> [GSSG+H]+ Gb pikinin LC-MS spektrumunda 380.2 m/z -> [GSSA+H]+ 24 saat sonunda G2/M fazında tutuklanma görülmektedir