TIBBİ BİYOLOJİ ANABİLİM DALI DÖNEM I ÖĞRENCİ LABORATUVARI / 2 KANDAN DNA İZOLASYONU, ELEKTROFOREZİ, KESİMİ,HARİTALANMASI VE BLOTLANMASI
Lökositler
Restriksiyon Enzimlerine Örnekler
Restriksiyon Enzimlerin Kesimleri
Primer nedir nasıl yapılır ne işe yarar ? 15 ile 20 baz çifti arasında değişen sentetik kısa DNA parçaları. Genellikle PCR ve DNA dizilemesi amacı ile kullanılırlar. Hairpin oluşturulmamasına dikkat edilmelidir. Dimer oluşturmamasına dikkat edilmelidir. 3’-OH ucu açık olmalıdır. Erime sıcaklığı belli bir değerin üstünde ve altında olmamalıdır.
PCR
PCR (Polimeraz Zincir Reaksiyonu)
Agaroz Sınıf:Polisakkarid Sistematik Adı: (14)-3,6-anhydro-α-L-galactopyranosyl-(13)-β-D-galactopyranan
Akrilamid ve Poliakrilamid
Poliakrilamid
PCR ürünlerinin %0.8’lik agaroz jeldeki görüntüleri
Apo E’nin PCR ürünü ve Hin6I enzimi kesimi sonucu oluşan tüm genotipleri M PCR 2/2 2/3 2/4 3/3 3/4 4/4 M
Analizde kullanılan Hin6I enzimi ile kesilmiş bir Apo E jel görüntüsü
PCR Ürününün Restriksiyon Enzim Kesimi ve Jel Görüntüsü
SSCP Analizi
Agaroz Jel Yapımı
Agaroz Jelin Görüntülenmesi
Poliakrilamid Jel Elektorforez (PAGE) Sistemi
Jelin Yüklenmesi
Pulsed Field Electrophoresis for Separation of Large DNA
SOUTHERN BLOT