UYGULAMALI ÇALIŞMA V KAN FİZYOLOJİSİ -2

DENEYLER KAPİLER KAN TOPLAM LÖKOSİT SAYIMI KANDAN YAYMA PREPARAT HAZIRLANMASI: LÖKOSİT ALTGRUP DAĞILIMI (FORMÜLÜ) VENÖZ KAN PIHTILAŞMA VE (ANTİ-)KOAGÜLANLARIN ETKİSİ PIHTILAŞMA ZAMANININ TAYİNİ KANAMA ZAMANININ TAYİNİ (Duke Metodu) KANDAN FİBRİN ELDESİ

TOPLAM LÖKOSİT SAYIMI Lökosit pipeti: + 11 e kadar ölçekli + Beyaz boncuklu SULANDIRMA KATSAYISI 1: 20 Sayma kamarası Basamaklar: Lökosit pipetine 0.5 çizgisine kadar kapiler kan alınır Lökosit sulandırma eriyiği ile haznenin üst sınırına (11 çizgisi) kadar sulandırılır Boncuk yardımıyla karıştırılır Sayma kamarasına karışan kısım eklenerek mikroskopta sayılır

SAYMA KAMARASI 1/10 mm örnek derinliği

TOPLAM LÖKOSİT SAYISI 1 mm3= ml kanda 4000-10000 SAYILAN DEĞER X (1-4) mm2 X 0,1 mm X 20 X 10 Sayılan alan Yükseklik Sulandırma katsayısı 1 mm3 = 1 mm3 kandaki toplam lökosit sayısı

LÖKOSİT SAYIM ALANI (1 mm2) (10X)

LÖKOSİT SAYIM ALANI (2/16) (20X)

4 LÖKOSİT

DENEYLER KAPİLER KAN TOPLAM LÖKOSİT SAYIMI KANDAN YAYMA PREPARAT HAZIRLANMASI: LÖKOSİT ALTGRUP DAĞILIMI (FORMÜLÜ) VENÖZ KAN PIHTILAŞMA VE (ANTİ-)KOAGÜLANLARIN ETKİSİ PIHTILAŞMA ZAMANININ TAYİNİ KANAMA ZAMANININ TAYİNİ (Duke Metodu) KANDAN FİBRİN ELDESİ

PERİFERİK KANDAN YAYMA PREPARAT HAZIRLAMA İki lam: Birine 1 damla kapiler kan

Periferik Yayma Preparatı Kan sürüntüsünün baş kısmı Gövde kısmı Kuyruk kısmı

YAYMA PREPARATIN DEĞERLENDİRİLMESİ Boyanarak ışık mikroskobunda inceleme ile: Metilen mavisi + Eozin Asidik yapıları boyar Bazik yapıları boyar DNA Majör bazik protein (Örnek) Uygulanan yöntem: Giemsa Boyama 5 ‘ May-Grünwald (Fiksasyon) Yıka 10 ’ Giemsa Yıka Kurut İmersiyon objektifi (100X) ile imersiyon yağı damlatarak mikroskopta incelenir

PERİFERİK KAN LÖKOSİT ALTGRUP DAĞILIMI (FORMÜLÜ) % oranı Sayısı mm3 = ml kanda Nötrofil % 40-75 1600-7500 Eozinofil % 1-6 40- 600 Bazofil <% 1 <40- 100 Monosit % 2-10 80-1000 Lenfosit % 20-45 800-4500

Normal Periferik Kan Eritrositler Lökositler Trombositler Sayım alanı Normal blood film. Red cells have a zone of central pallor approximately 1/3 the size of the RBC (similar to diameter of a small lymphocyte). The blue cell on the left is a band, the right a neutrophil. The small fuzzy blue cells are platelets.

Yayma Preparatta Kalın Kısım – İnce Kısım

Eritrositler

Eritrositler

Lökosit Alt Grupları Kırmızı granül Parçalı çekirdek Mor ince granül Granül yok Parçasız çekirdek Mor granül Parçalı çekirdek Granül yok Çentikli çekirdek

Çomak ve Parçalı Nötrofil İnce mor granüllü

1 Lenfosit ve 1 Parçalı Nötrofil Yoğun yuvarlak tek çekirdek Dar sitoplazma

Monosit Granül seçilmiyor Çentikli geniş çekirdek Geniş sitoplazma

Bazofil Mor iri granüllü Parçalı çekirdekli

Trombositler Küçük parçacık görünümünde Çekirdekli hücrelerin çekirdeklerine yakın renkte Kümeler halinde Her alanda 1-2 adet

WEB SİTESİNDE GÖRÜLECEK GÖRÜNTÜLER

Analizatör Cihazlarla Lökosit Sayımı Sonucu Toplam lökosit sayısı 10^3=103, yani 1000 Lökosit sayısını söylerken binli sayılar olarak söylüyoruz Lökositleri % olarak verir L= Litrenin milyonda biri, yani mm3 karşılığı # (sayı) olarak da altgrupları verir

Analizatör Cihazlarda Lökosit Sitogramı Hücre büyüklüğü Her bir hücrenin büyüklüğünü ve granül içeriğini inceler ve iki boyutlu bir grafik olarak gösterir. Lökosit altgrupları bu ölçümlere göre değerlendirilir. Şüpheli durumlarda bu değerler periferik yayma preparatı ile doğrulanır. Granülarite

Analizatör Cihazlarda Lökosit Sitogramı Büyük ve granüllü hücreler: Nötrofiller Granülsüz ve küçük hücreler: Lenfositler Hücre artıkları

DENEYLER KAPİLER KAN TOPLAM LÖKOSİT SAYIMI KANDAN YAYMA PREPARAT HAZIRLANMASI: LÖKOSİT ALTGRUP DAĞILIMI (FORMÜLÜ) VENÖZ KAN PIHTILAŞMA VE (ANTİ-)KOAGÜLANLARIN ETKİSİ PIHTILAŞMA ZAMANININ TAYİNİ KANAMA ZAMANININ TAYİNİ (Duke Metodu) KANDAN FİBRİN ELDESİ 28

PIHTILAŞMA VE (ANTİ-)KOAGÜLANLARIN ETKİSİ Tüplere maddeler (0,2 ml) konulur ve kan (1 ml) eklenir: + Kan Sodyum (Na)-sitrat + Kan Sodyum (Na)-sitrat + Kan + Kalsiyum (Ca) klorür Heparin + Kan + Kan + Kalsiyum (Ca) klorür Pıhtılaşma gözlenerek değerlendirilir. Yalnız kan olan tüpe göre farklar gözlenir.

KOAGÜLASYON REAKSİYONU (KASKADI) PIHTILAŞMA ZAMANI (GENEL TEST) KOAGÜLASYON REAKSİYONU (KASKADI) HMWK Kallikrein İntrensek yol Doku faktörü Ekstrensek yol XII XI IX VIII aPTZ PZ VII Aktive parsiyel tromboplastin zamanı Protrombin zamanı V+X Trombin Fibrinojen Fibrin

KANAMA ZAMANININ TAYİNİ Duke Metodu (Normal değeri: 1 – 3 ’) Parmak ucundan lanset kesisi ile uygulanır. Düzenli aralıkla (10 “) filtre kağıdı ile kan uzaklaştırılarak kanamanın durma süresi saptanır.

KANDAN FİBRİN ELDESİ Venöz kan örneği porselen yüzeyde “pıhtılaştırılırken” oluşan fibrin yapısı lifler halinde süpürge çöpünde gözlenir!! Fibrinin beyaz, şeffaf yapısı ve arasında sıkışan eritrositler ve pıhtı yorumlanır.

SARI FİBRİN LİFLERİ