UYGULAMALI ÇALIŞMA V KAN FİZYOLOJİSİ -2 2014-2015
DENEYLER KAPİLER KAN TOPLAM LÖKOSİT SAYIMI KANDAN YAYMA PREPARAT HAZIRLANMASI: LÖKOSİT ALTGRUP DAĞILIMI (FORMÜLÜ) VENÖZ KAN SEDİMENTASYON HIZI ÖLÇÜMÜ
TOPLAM LÖKOSİT SAYIMI Lökosit pipeti: + 11 e kadar ölçekli + Beyaz boncuklu SULANDIRMA KATSAYISI 1: 20 Sayma kamarası Basamaklar: Lökosit pipetine 0.5 çizgisine kadar kapiler kan alınır Lökosit sulandırma eriyiği ile haznenin üst sınırına (11 çizgisi) kadar sulandırılır Boncuk yardımıyla karıştırılır Sayma kamarasına karışan kısım eklenerek mikroskopta sayılır
SAYMA KAMARASI 1/10 mm örnek derinliği
TOPLAM LÖKOSİT SAYISI 1 mm3= ml kanda 4000-10000
LÖKOSİT SAYIM ALANI (1 mm2) (10X)
4 LÖKOSİT
DENEYLER KAPİLER KAN TOPLAM LÖKOSİT SAYIMI KANDAN YAYMA PREPARAT HAZIRLANMASI: LÖKOSİT ALTGRUP DAĞILIMI (FORMÜLÜ) VENÖZ KAN SEDİMENTASYON HIZI ÖLÇÜMÜ
PERİFERİK KANDAN YAYMA PREPARAT HAZIRLAMA İki lam: Birine 1 damla kapiler kan
Periferik Yayma Preparatı Kan sürüntüsünün baş kısmı Gövde kısmı Kuyruk kısmı
YAYMA PREPARATIN DEĞERLENDİRİLMESİ Boyanarak ışık mikroskobunda inceleme ile: Metilen mavisi + Eozin Asidik yapıları boyar Bazik yapıları boyar DNA Majör bazik protein (Örnek) Uygulanan yöntem: Giemsa Boyama 5 ‘ May-Grünwald (Fiksasyon) Yıka 10 ’ Giemsa Yıka Kurut İmersiyon objektifi (100X) ile imersiyon yağı damlatarak mikroskopta incelenir
PERİFERİK KAN LÖKOSİT ALTGRUP DAĞILIMI (FORMÜLÜ) % oranı Sayısı mm3 = ml kanda Nötrofil % 40-75 1600-7500 Eozinofil % 1-6 40- 600 Bazofil <% 1 <40- 100 Monosit % 2-10 80-1000 Lenfosit % 20-45 800-4500
Normal Periferik Kan Eritrositler Lökositler Trombositler Sayım alanı Normal blood film. Red cells have a zone of central pallor approximately 1/3 the size of the RBC (similar to diameter of a small lymphocyte). The blue cell on the left is a band, the right a neutrophil. The small fuzzy blue cells are platelets.
Yayma Preparatta Kalın Kısım – İnce Kısım
Eritrositler
Lökosit Alt Grupları Kırmızı granül Parçalı çekirdek Mor ince granül Granül yok Parçasız çekirdek Mor granül Parçalı çekirdek Granül yok Çentikli çekirdek
Çomak ve Parçalı Nötrofil İnce mor granüllü
1 Lenfosit ve 1 Parçalı Nötrofil Yoğun yuvarlak tek çekirdek Dar sitoplazma
Monosit Granül seçilmiyor Çentikli geniş çekirdek Geniş sitoplazma
Bazofil Mor iri granüllü Parçalı çekirdekli
Trombositler Küçük parçacık görünümünde Çekirdekli hücrelerin çekirdeklerine yakın renkte Kümeler halinde Her alanda 1-2 adet
Analizatör Cihazlarla Lökosit Sayımı Sonucu Toplam lökosit sayısı 10^3=103, yani 1000 Lökosit sayısını söylerken binli sayılar olarak söylüyoruz Lökositleri % olarak verir L= Litrenin milyonda biri, yani mm3 karşılığı # (sayı) olarak da altgrupları verir
Analizatör Cihazlarda Lökosit Sitogramı Hücre büyüklüğü Her bir hücrenin büyüklüğünü ve granül içeriğini inceler ve iki boyutlu bir grafik olarak gösterir. Lökosit altgrupları bu ölçümlere göre değerlendirilir. Şüpheli durumlarda bu değerler periferik yayma preparatı ile doğrulanır. Granülarite
Analizatör Cihazlarda Lökosit Sitogramı Büyük ve granüllü hücreler: Nötrofiller Granülsüz ve küçük hücreler: Lenfositler Hücre artıkları
Lökosit sayısı değişiklikleri Lökopeni Nötropeni Eozinopeni? Lenfopeni Lökositoz Nötrofili Eozinofili Monositoz Lenfositoz
DENEYLER KAPİLER KAN TOPLAM LÖKOSİT SAYIMI KANDAN YAYMA PREPARAT HAZIRLANMASI: LÖKOSİT ALTGRUP DAĞILIMI (FORMÜLÜ) VENÖZ KAN SEDİMENTASYON HIZI ÖLÇÜMÜ
SEDİMENTASYON TAYİNİ Sedimentasyon kanın şekilli elemanlarının yer çekimi ile çökme hızıdır. -0 mm -100 mm ANTİ-KOAGÜLAN SİTRAT (%3,8) 0,4 ml (SİYAH KAPAK) VENÖZ KAN 1,6 ml Erkekte: 0- 8 mm / 1.saat Kadında: 0-16 mm / 1.saat WESTERGREN TÜPÜ VE STATİVİ
Sedimentasyon Artışı-Hızlanması Akut faz yanıtı: Fibrinojen ↑ İnfeksiyon İnflamasyon Malignite Akut faz yanıtı: Fibrinojen ↑ g-Globulin ↑ C reaktif protein ↑
İNFLAMASYONUN SİSTEMİK BULGULARI 1. ATEŞ: İL-1, İL-6 ve TNF-a Hipotalamus 2. LÖKOSİTOZ: İL-1, İL-6, CSF ler Kemik iliği 3. AKUT FAZ YANITI: İL-1, İL-6, TNF-a Karaciğer Sedimentasyon artışı: C reaktif protein Serum amiloid A proteini Haptoglobin Mannoz bağlayan lektin (MBL) Fibrinojen a1 Antitripsin a2 Makroglobulin Seruloplazmin g-globulin 4. GLUKOKORTİKOİD SALINIMI: İL-1, İL-6 Hipofiz ve adrenal bez