MANTAR ENFEKSİYONLARININ LABORATUVAR TANISI

... konulu sunumlar: "MANTAR ENFEKSİYONLARININ LABORATUVAR TANISI"— Sunum transkripti:

1 MANTAR ENFEKSİYONLARININ LABORATUVAR TANISI
Yüzeyel Subkutanöz Sistemik Fırsatçı

2 En önemlisi mantardan şüphelenmek
İyi bir anamnez almak Risk altındaki kişleri özenle incelemek İyi bir muayene yapmak Gerekli-uygun klinik örnekleri alarak tanı koymak

3 DOĞRU MİKOLOJİK TANI Örnek alma Örneklerin taşınması, saklanması
Kültür için steril kapların kullanılması Uygun materyal/lerin ve testlerin seçilmesi Hastaya ait bilgi verilmeli Şüphelenilen mantar belirtilmeli

4 Keratinli doku örnekleri
Solunum yolu örnekleri Eksüda/Püy İdrar Steril vücut sıvıları(BOS, plevra, perikard) Kan Mukoza Doku 24 saatlik balgam ve idrar örnekleri uygun değil GIS mantar enf.da kültür yerine biyopsi daha uygun

5 Mikolojik tanı Mikrobiyolojik İmmunolojik(serolojik) Histopatolojik
Moleküler Biyokimyasal Yöntemlerle yapılır

6 Tanı Direkt inceleme Klinik örneklerin direkt incelenmesi
Zaman kazandırıcı, kolay,en hızlı, en ekonomik BOS’un çini mürekkebi preparatında kapsüllü maya görülmesi; kistlerin görülmesi(P. jirovecii); hücre içi mayaların görülmesi(H. capsulatum); sferül saptanması (C. İmmitis) Bazen kültürden daha değerli Dokuda Aspergillus’un hiflerinin görülmesi Direkt mikroskobikültürden daha az duyarlı Direkt mikroskobinegatif ise mantar enf. ekarte edilemez

7 Tanı Direkt inceleme KOH (%10-25) Çini mürekkebi Kalkoflor beyazı
Laktofenol pamuk mavisi Giemsa PAS

8 Tanı Kültür Sabouraud dextrose agar(SDA)
Mikobiyotik agar (kloramfenikol+sikloheksimid) Yeast extract phosphate agar Kanlı beyin-kalp-infüzyon agar Beyin-kalp-infüzyon agar Kloramfenikol+Gentamisin, Penisilin+streptomisin

9 Tanı Kültür için Sikloheksimidli bir besiyeri Antibiyotiksiz bir SDA
Antibiyotikli SDA ya da BHI-agar

10 Tanı Küf mantarlarının tanımlanması
1- Koloni morfolojisi ve rengi Aspergillus Penicillium

11 2- Üreme hızı H. capsulatum 5-21 gün Aspergillus  2-3 gün
C. albicans  1-2 gün

12 3- Dimorfizm (37°C’de maya , 25°C’de küf formunda)
H. capsulatum B. dermatitidis P. brasiliensis C. immitis

13 4- Üreme ısısı: Aynı cins içindeki türleri, aynı tür
içindeki varyeteleri ayırmada yararlı A. fumigatus    45°C Rhizomucor    55°C

14 5- Mikroskobik olarak sporların incelenmesi
Cornmeal ya da patates dekstroz agara ekim Selofan bant yöntemi Lam kültürü

15 Tanı Küf mantarlarının tanımlanması
6- Moleküler biyolojik teknikler Hibridizasyon yöntemleri (Gen-Probe) - PCR

16 Tanı Küf mantarlarının tanımlanması
7- Serolojik yöntemler ELISA Antikor Serumda Galaktomannan(GM) antijeni(LA, RIA, EIA) - 1,3--glukan(Limulus testi)(Aspergillus) - Metabolit D-Mannitol(Pulmoner Aspergilloz)

17 Tanı Maya mantarlarının tanımlanması
1- Koloni morfolojisi Renk: KremSarı Turuncu Kırmızı - Yumuşak kıvamlı - Mukoit görünüm ( C. neoformans)

18 Tanı Maya mantarlarının tanımlanması
2- Üreme ısısı 3- Mikroskobik görünüm - Eşeysiz sporların gözlenmesi: Mısırunu agar/Mısırunu-Tween 80 agara ekim. - Hif varlığı - Yalancı hif varlığı - Blastokonidiya oluşturma - Klamidospor oluşturma - Artrokonidiyum varlığı/yokluğu

19 Tanı Maya mantarlarının tanımlanması
4- Biyokimyasal özellikler A- Karbonhidrat asimilasyon- fermentasyon testi

20 Tanı Maya mantarlarının tanımlanması
Biyokimyasal özellikler B- Üreaz testi

21 Tanı Maya mantarlarının tanımlanması
Biyokimyasal özellikler C- Fenoloksidaz testi Cryptococcus neoformans Guizotia abysinica(niger seed)

22 Tanı Maya mantarlarının tanımlanması
5- Serolojik yöntemler Fikir vericidir Kültür-histopatolojiyi destekler Rutin lab.da kullanılan ticari kitler dışında referans lab da uygulanmalıdır

23 Tanı Maya mantarlarının tanımlanması
Serolojik yöntemler Yalancı pozitiflik görülebilir İmmün yetmezliklilerde ab yanıtı oluşmayabilir Ab titresi yüksek olmalıdır İki-üç hafta sonra titrede  görülmeli

24 Tanı Maya mantarlarının tanımlanması
Serolojik yöntemler -Serum -İdrar -BOS -Vücut sıvıları

25 Tanı Candida Seroloji- ELISA
Antikor(histoplazmoz ve koksidiyoidomikoz tanısında kullanılan testler duyarlı; öteki sistemik mikozlardaki testler duyarlı /özgül değil) Antijen(mannan, enolaz) Metabolit; D-Arabinitol (serumda:kandidemi) BAL sıvısında : pulmoner aspergilloz)

26 Tanı Cryptococcus neoformans
Seroloji- Kapsül polisakkarit ag’leri(EIA, LA)C. neoformans menenjiti H. capsulatum polisakkarit Ag leri Yayılım özelliği gösteren histoplazmoz