İntrasitoplazmik Sperm Enjeksiyonu (ICSI)

... konulu sunumlar: "İntrasitoplazmik Sperm Enjeksiyonu (ICSI)"— Sunum transkripti:

1 İntrasitoplazmik Sperm Enjeksiyonu (ICSI)

2 Spermatogenezis

3 Spermatogenezis

4 Tarihçe

5

6

7 Normal fertilizasyon sırasında, sperm nukleusu iki gamet arasında oluşan membran füzyonu sayesinde oosit içerisine girer. Uehara ve Yanagimachi ilk kez hamster oositleri içerisine yerleştirilen sperm nukleusunun pronukleusa dönüştüğünü gösterdikten sonra bazı araştırıcılar bu teknikle yavru elde etmeye çalışmıştır. Bu teknik ile hayvanlarda (tavşan ve sığır) sınırlı başarı elde edilmesine rağmen, insanlarda çok başarı ile kullanılmıştır. Ağustos 1994'te dünya çapında ICSI'den elde edilen gebelik sayısı 500 ila 600 arasında iken, yaklaşık 175 canlı doğum gerçekleşmiştir. Kimura, Y & Yanagimachi, R BOR, 52: (1995)

8 Farede ICSI - 1 Kimura, Y & Yanagimachi, R BOR, 52: (1995)

9 Farede ICSI - 2 Kimura, Y & Yanagimachi, R BOR, 52: (1995)

10 Farede ICSI - 3 Kimura, Y & Yanagimachi, R BOR, 52: (1995)

11 Farede ICSI - 4 Kimura, Y & Yanagimachi, R BOR, 52: (1995)

12 ICSI sonrası - hemen Kimura, Y & Yanagimachi, R
BOR, 52: (1995)

13 Aynı görüntü Kimura, Y & Yanagimachi, R BOR, 52: (1995)

14 1 saat 45 dk sonrası Kimura, Y & Yanagimachi, R
BOR, 52: (1995)

15 Pronüklear dönem – 5 saat sonrası
Kimura, Y & Yanagimachi, R BOR, 52: (1995)

16 1 gün sonrası Kimura, Y & Yanagimachi, R BOR, 52: (1995)

17 4 gün sonrası Kimura, Y & Yanagimachi, R BOR, 52: (1995)

18

19

20 Neden? Başarısız IVF uygulamaları
İleri düzeyde sayı, hareket ve morfoloji bozukluğu PGD (pre-implantasyon genetik tanı) yapılması gereken durumlar Olgun spermatozoon bulunmaması (Azoospermi) Obstrüktif azoospermi Non obstrüktif azoospermi Anormal spermatozoon fazlalığı (%4 ile %14 arasında normal form varsa IVF) TMS'nin < 1.5 milyon ve kesin morfolojinin < %4 olması durumunda ise ICSI uygundur. ( Kadın yumurta sayısı 5 veya daha altında ise nedene bakılmaksızın daha yüksek döllenme elde etmek amacı ile (

21 Obstrüktif Azoospermi
Enfeksiyon (genital organlarda iltihap): Orşit, epididimit v.s. Geçirilmiş olan operasyonlar (varikosel ameliyatı komplikasyonu v.s.) Travma ve kaza Korunma amacıyla erkeğin tüplerini daha önce bağlatmış olması (Vas deferens'lerin iki taraflı bağlanması = vazektomi operasyonu) Doğuştan tıkanıklar (konjenital bilateral vas deferens yokluğu v.s.)

22 Non Obstrüktif Azoospermi
Genetik nedene bağlı olanlar (Azoospermik erkeklerde kromozomal bozukluk bulunma ihtimali %12-15'dir.) Tek gen mutasyonları Klinefelter sendromu (47, XXY) (%25 oranında) (1/500 canlı doğumda) Erkek turner sendromu XYY sendromu (47, XYY) Y kromozomu mikrodelesyonları v.s.

23 Non Obstrüktif Azoospermi
Hormonal nedene bağlı olanlar Kalmann sendromu Hipogonadotropik hipogonadizm Hipergonadotropik hipogonadizm Panhipopitüarizm Santral sinir sistemi lezyonları

24 Non Obstrüktif Azoospermi
Radyoterapi veya radyasyon İlaçlara bağlı gelişen (Kemoterapi) Diğer nedenler endüstriyel toksinler uzun süreli yüksek ısılı ortamlarda çalışmak

25 Yıkama sonrası total sperm sayısına (TMS) göre seçilecek tedavi
TMS (a + b) Normal morfoloji Seçilecek yöntem 5 milyon'un üzerinde 4-6 siklus IUI 1-5 milyon %4'ün üzerinde 4-6 siklus IUI veya IVF %4'ün altında ICSI 1 milyonun altında IUI: intrauterin inseminasyon

26 Preimplantasyon Genetik Tanı

27 Fluorescence In Situ Hybridization (FISH)
kromozom 13, 16, 18, 21, 22, X ve Y

28 Hayvanlarda ICSI Transgenesis Bilimsel çalışmalar
Liyofilize sperm kullanımı

29

30 Tek bir spermatozoonun bir oosit içerisine mikrocerrahi ile yerleştirilmesi, genellikle intrasitoplazmik sperm enjeksiyonu yada ICSI olarak isimlendirilir, ciddi erkek faktörlü infertilite ve açıklanamayan total fertilizasyon başarısızlıklarının tedavisinde tercih edilen bir metot olmaktadır. ICSI yöntemiyle, morfolojik olarak seçilen iyi oositlerin %60-90'ı (bazen %100'ü) fertilize olmaktadır. Günümüzde, çocuğu olmayan binlerce çift başarısız IVF girişimleri nedeniyle çocuk sahibi olamamakta, fakat ICSI tekniği sayesinde bir şans elde etmektedir. ICSI hayvanlar ve insanlarda geleneksel tohumlama yöntemlerinin yerini alamaz, ancak diğer yöntemler başarısız olduğunda son yöntemdir.

31 Gelişmiş ülkelerde evli çiftlerin yaklaşık %15'i yaşamlarının bir döneminde infertilite sorunu yaşar. Bu sıklık, anne-baba yaşının atrmasıyla ve ekolojik ve sosyal sorunlar nedeniyle giderek artmaktadır. İnfertilite kliniklerine gelen 10 çiftten 9'u kendi genetik çocuğu olmasını arzu etmektedir. Bu durum yardımlı üreme tekniklerinin kullanımını artırmaktadır.

32

33

34

35 (A) Sperm head before the acrosome reaction; acp, the principal (acrosomal cap) region of acrosome; eq, the equatorial region of acrosome. (B-C) The acrosome-reacted spermatozoon passes through the zona pellucida (zp) and the perivitelline space (pvs). (D-E) Membrane fusion begins between sperm plasma membrane over the equatorial segment (eq) of acrosome and oocyte plasma membrane. Cortical granules (cg) are quickly exocytosed to modify both the oocyte surface and the zone pellucida to prevent polyspermic fertilization. (F-G) The anterior portion of sperm head is engulfed into the oocyte in a phagocytic fashion, while the rest of the sperm head and tail enter the oocyte by plasma membrane fusion. Note that the contents of acrosomal cap never enter the oocyte. Sperm plasma membrane also does enter the oocyte: it mingles with the oocyte plasma membrane to become a mosaic plasma membrane of the zygote. (H) The inner acrosomal membrane (iam) separates from the decondensing sperm nucleus. Endoplasmic reticulum (er) gradually form the envelope of the male pronucleus.

36 Electron micrographs of mouse spermatozoa injected into oocytes
Electron micrographs of mouse spermatozoa injected into oocytes. A single epididymal spermatozoon was sucked into an injection pipette and immobilized by applying a few piezo-pulses to the midpiece region before injection into each oocyte. (A) Thirty minutes after ICSI; decondensation of sperm nucleus has begun: note that the entire acrosome is within the oocyte. (A') A cross-section of sperm tail with the plasma membrane partially missing (arrow). (B) About 60 min after ICSI. Sperm nucleus has extensively decondensed. Acrosome (left) and midpiece mitochondria and axoneme (right) are seen.

37

38

39

40

41

42

43

44 Improving Animal ICSI - 1

45

46 Improving Animal ICSI - 2

47 Improving Animal ICSI - 3

48

49 Summary - General

50 Summary - General

51 Summary - General

52 Summary – Animal ICSI

53 Summary – Animal ICSI

54 Summary – Human ICSI

55 Summary – Human ICSI

56 Summary – Human ICSI

57 Summary – Human ICSI